大鼠嗅球切除模型

雄性大鼠，體重300-350 g，SD大鼠應用最廣泛。

1. 藥品與試劑

水合氯醛（或其它麻醉藥物如戊巴比妥鈉）；無菌生理鹽水（或PBS或雙蒸水）；H2O2溶液；吸收性明膠海綿；青霉素鈉粉；云南白藥；乙醇。

2. 實驗儀器 腦立體定位儀；電動磨鉆；自制探針；真空水泵；手術器械。

3. 實驗方法

在手術前1周內，每日對大鼠進行2次撫摸以減少應激。術前給予水合氯醛（400 mg/kg，ip）麻醉大鼠，在兩耳聯線中點處將皮膚切開，暴露顱骨，在距前囟前8 mm，與正中縫兩側旁開2 mm的交點處，分別用電動磨鉆將顱骨鉆兩個直徑2 mm 的小孔，用自制探針攪動破壞嗅球后，再用真空泵將破壞的嗅球組織吸出。將吸收性明膠海綿填入小孔止血。假手術大鼠采用相同的手術方法，但在手術定位點上鉆孔后不損傷嗅球。術后采用75 %乙醇-云南白藥混合劑涂抹傷口，并肌注青霉素鈉（40000 U/ml），連續注射4 d，以防術后感染。嗅球切除術后大鼠需恢復14 d，恢復階段每日撫摸大鼠以減少應激性，14天后方可進行藥物處理及行為學測試。行為學測試主要包括開場實驗、蔗糖飲水實驗、被動回避實驗等。

圖1 大鼠嗅球解剖位置示意圖

4. 注意事項

（1）大鼠體重會影響嗅球解剖位置的定位坐標；

（2）術前、術后的撫觸可有效減少大鼠的應激反應；

（3）手術過程中應盡量減少出血；

（4）行為學測試結束后，每只動物需檢查嗅球和前額葉皮層位置，對于嗅球切除體積低于70%或損傷前額葉皮層的動物，數據應剔除。

圖2 大鼠嗅球切除前后對比（A嗅球切除前；B嗅球切除后）

5. 模型分析指標

5.1 開場實驗

利用大鼠自主活動實驗實時檢測系統進行實驗。自主活動測試箱為黑色不銹鋼材料制成的圓柱形桶，測試箱頂部敞開。采用圖像采集系統對測試大鼠的行為進行實時監測，再通過計算機系統對。大鼠的自主活動信息進行數據處理。檢測時將大鼠面壁放入測試箱內，動物放入測試箱內，立即開始檢測。每次實驗時應從同一位置同一方向放入動物。實驗檢測時間宜為5 min-10 min。

5.2 強迫游泳實驗　

利用計算機圖像實時檢測分析處理系統自動分析記錄動物運動狀態。將小鼠放入小鼠強迫游泳儀器中( 高20 cm，直徑18 cm，水深12 cm)，保持水溫(23~25 °C)。動物適應2 min后，系統自動記錄動物后4 min 內的累積不動時間( 不動狀態即小鼠四肢有輕微動作以保持頭部在水面，小鼠呈現出停止掙扎或呈漂浮狀態)。