1、實驗環境
實驗室環境隔音，溫度：23-25 ℃，濕度：55%。12h/12h明暗周期。動物適應3-5天開始實驗。
2、刺激因子
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刺激因子
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說明
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禁食禁水(food ,water deprivation)
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禁食或禁水與同時禁食禁水分開應用，同時禁食禁水可用于糖水測試前。
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強迫游泳(forced swimming)
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大鼠在25℃水中游泳20-30 min
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傾籠(cage tilting)
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鼠籠傾斜45度，一般安排在禁食禁水之后，加大大鼠進食進水的難度。
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濕籠(damp sawdust)
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將250 ml水倒入大鼠墊料中
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頻閃(stroboscopic illumination)
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120 flashes/min, 6 h
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晝夜顛倒(inversion light/dark cycle)
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12小時晝夜顛倒
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配對飼養(group housing)
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夜間或禁水后應用，更為有效。
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束縛(restraint)
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將動物放入固定器（長20cm,直徑8cm）束縛2-4 h.
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間斷照明(intermittent light)
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2 h 明暗交替
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噪聲(white noise)
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85 dB，30分鐘。
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除表中列舉的刺激因子外，還可選擇天敵聲音（10-15分鐘）、冰水游泳（3-5分鐘）等溫和性刺激因素。
3.實驗步驟
（1）糖水偏愛基線測試
動物單籠飼養，訓練大鼠適應含糖飲水：第一個24小時，每籠同時放置兩瓶1%蔗糖水；第二個24小時，放置一瓶蔗糖水，一瓶飲用水。大鼠禁食禁水24小時后，同時給予每只大鼠事先稱量好的兩瓶水:一瓶1 %蔗糖水,一瓶飲用水。1h后，取走兩瓶并稱重。計算動物的糖水偏愛指數 (糖水偏愛= 糖水消耗/ 總液體消耗×100 %)。依據糖水偏愛指數進行分組。
（2）給予刺激因子
幾種不同的應激因素在實驗全程中應用，順序隨機，使動物不能預料應激因素的發生。
注：上表僅為舉例。實驗操作中依據實驗者需要進行設計。
4.推薦實驗條件
（1）CUMS模型對Wistar 或Lister 品系較為敏感，而對SD或Long-Evans等不敏感。小鼠常用ICR；
（2）開始給予刺激因子時，大鼠體重至少為300 g，小鼠至少28 g；
（3）刺激因子至少6種以上。
5.注意事項
（1）刺激因子的多變性和不可預測性是模型成功的關鍵。
（2）糖水偏愛測試時，將水瓶放置于測試房間一段時間再進行檢測，測試房間保持安靜。17:00左右為測試敏感時間。
（3）糖水偏愛測試前，需禁食禁水，在此之前，不應給予任何應激因素，以免影響糖水測試結果。
（4）要求隔音并且較大的飼養空間。
6. 模型分析指標
6.1 糖水偏愛實驗
于造模結束后第1 天開始實驗( 造模前進行糖水偏愛訓練)。糖水偏愛實驗分為訓練期( 適應期) 及測試期。訓練期內，給予動物一瓶蔗糖糖水(2%) 和一瓶純水，動物自由飲水，讓小鼠適應含糖飲水。動物禁食( 不禁水)8h 后進行動物的糖水/ 純水消耗實驗測試(15h)，根據動物糖水、純水攝入量計算動物的糖水偏愛指數( 糖水偏愛指數= 糖水消耗/ 總液體消耗×100 %)。本實驗進行2次糖水偏愛實驗。造模前進行糖水偏愛訓練及基線測試，根據結果，將動物分組。應激結束后，再進行一次糖水偏愛測試，以評價CUMS 模型快感缺失的癥狀。
6.2 新奇抑制攝食實驗
于造模結束后第2天開始實驗。新奇抑制攝食實驗總共分2 天：第一天為適應期，給藥后1 h，將動物放入方形敞箱(42 cm × 31 cm ×20 cm，長 × 寬 × 高) 適應10 min。在動物禁食(不禁水)24 h 后進行新奇抑制攝食實驗檢測，在敞箱中心放一食丸，將動物背對食丸放入，保持每次同
一位置、同一方向，觀察記錄動物自放入籠中至首次攝取食物的時間( 即攝食潛伏期)，每次5 min，以動物開始咬食食丸為攝食標準。
6.3 小鼠懸尾實驗
于造模結束后第3 天開始實驗。將膠布貼于距小鼠尾尖部約1 cm 處，使小鼠倒掛于懸尾箱支架上，傳感器接收小鼠掙扎時的張力變化信號，將信號處理轉化后送往計算機，小鼠懸尾實時檢測分析處理系統自動記錄小鼠不動時間，實驗總共6 min，適應2 min 后系統自動統計小鼠后4 min 內懸尾累積不動時間(“不動”即小鼠停止掙扎不動或無任何活動)。
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