檢測背景

　　病毒保存液是一種病毒采樣管內添加的專門用來保護鼻咽拭子采樣后樣本的保護型液體介質。病毒保存液起到保存病毒樣本的作用，既保證了核酸病毒的完整性，又便于后期的檢測準確性，病毒保存液檢測目的驗證病毒滅活效果。

　　目前市面上有兩種病毒保存液，分別是滅活型病毒保存液和非滅活型病毒保存液。

　　滅活型病毒保存液是為了裂解和滅活病毒的，它可以保護檢測人員不受病毒的第二次感染傷害。滅活型病毒保存液主要是核酸提取裂解液改良的病毒裂解性保存液，里面添加有高濃度的裂解鹽，能夠迅速高效地使待測樣本里的病毒蛋白裂解失活，同時又含有RNA酶抑制劑，這樣既能保護病毒核酸不被降解，又能保證核酸的完整性而不影響后續的檢測結果。在常溫下也可以保存相對較長的時間，節省了病毒樣本和運輸的成本。

　　非滅活型病毒保存液是為了保留病毒的蛋白質外殼以及病毒核酸DNA或者是RNA，這樣就可以保證病毒樣本核酸在送檢過程中的完整性，雖然操作失誤時會也有一定的感染性風險，但是這種保存液最大程度地保持了病毒樣本的原始性，是一種培養型的病毒運輸介質，需要注意的是長時間保存的需要在采樣后保持嚴格的低溫保存。

檢測條件

　　可開展針對流感病毒、腸道病毒、冠狀病毒、皰疹病毒等病毒保存液病毒滅活效果檢測，病毒保存液檢測可針對不同保存溫度、不同保存時間等不同條件下的病毒活性及病毒滅活率。

　　檢測方法

　　1. 病毒保存液檢測對象

　　毒株：甲型流感病毒HINI (VR- 1469)

　　細胞：MDCK細胞

　　2.病毒保存液檢測步驟：

　　1)取樣品病毒保存液(非滅活型) 9.8mL，加入0.2mL病毒原液混勻，分裝若干測試液，存至要求溫度;

　　2)保存至對應天數后取出測試液，檢測病毒滴度;

　　a)10倍倍比稀釋測試液;

　　b)將稀釋液加入含生長至單層的MDCK細胞的96孔細胞培養板上，并設置正常對照組，加等量培養液;

　　c)置于35'C、5%CO2的培養箱中孵育60 min后棄去上清液，加入雙抗400 IU/mL的維持培養液繼續孵育3~5天，每天觀察細胞增長狀況;

　　d)當接種病毒的MDCK細胞出現變圓或縮小等病變現象時，記錄產生細胞病變的情況;

　　e)根據Reed-Muench公式計算半數感染量TCID50。

　　報告模板

　　病毒保存液檢測報告模板主要包含試驗毒株、實驗批次、保存溫度、保存天數、病毒滴度、病毒活性及病毒滅活率等檢測數據，具體如下圖：

檢測機構資質證書

CMA認證

檢驗檢測機構資質認定證書

證書編號：241520345370

有效期至：2030年4月15日

CNAS認可

實驗室認可證書

證書編號：CNAS L22006

有效期至：2030年12月1日

ISO認證

質量管理體系認證證書

證書編號：ISO9001-2024001

有效期至：2027年12月31日

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