APP基因位于染色體21q11.2-22.2上，由18個外顯子和17個內含子組成。基因產物為跨膜糖蛋白，由APP基因通過選擇性剪切翻譯而成。APP至少有六種剪接形式，長度分別為365、563、695、714、751、770個氨基酸殘基，其中695、751和770為主要形式。APP695主要在大腦表達，尤其在AD病人的海馬回和皮層中APP695與APP751的比率異常，且與腦中這些部位斑塊的數量呈正相關。由APP編碼的APP蛋白經過加工水解可產生β淀粉樣蛋白（β amyloid， Aβ）。病理情況下，APP經過β分泌酶和γ分泌酶分解生成Aβ40和Aβ42，其中Aβ42與AD患者腦中Aβ沉積和神經元的變性密切相關。在家族性AD患者中已鑒定出多個APP基因的突變位點。其中大部分突變位于外顯子16和17的分泌酶裂解位點或APP跨膜區，如APP瑞典突變（APPswe：APP K670N和M671L）和倫敦突變（APPlon：APPV717I）。APP突變可改變APP的加工過程，導致具有神經毒性作用的Aβ42產生，引發多種病理機制，促使神經細胞凋亡或死亡，最終導致AD的發生。

構建帶有神經特異性啟動子的質粒PrP-hAPP695^K595N/M596L，用顯微注射法將線性化轉基因質粒注射到C57BL/6J小鼠受精卵中，以C57BL/6J小鼠作假孕受體

2、基因型鑒定

提取首建鼠后代鼠尾DNA，PCR擴增，1%瓊脂糖凝膠電泳，結果如圖1。

圖1. PCR鑒定APPswe轉基因小鼠的凝膠電泳分析結果。

1-2：陰性小鼠；3-8：APPswe轉基因陽性小鼠；9：Marker；10：陽性對照

3、APP蛋白在APPswe轉基因小鼠腦中的表達鑒定 

免疫組化：

抗人APP抗體免疫組化染色顯示轉基因小鼠大腦皮層和海馬神經元胞質陽性染色，神經膠質細胞及細胞間質未見陽性著色。陰性對照組小鼠皮層和海馬神經元胞質染色陰性。

圖2、抗人APP抗體免疫組化染色結果。