外泌體非靶向代謝組學檢測
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發布時間:2025-07-25 08:49:03 更新時間:2025-09-14 15:19:02
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作者:中科光析科學技術研究所檢測中心
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外泌體是一種在生物體內廣泛存在的細胞間通訊的載體,其直徑在30-150納米之間。外泌體可以從母細胞中包含并攜帶各種生物分子,包括蛋白質、脂質、DNA、mRNA、微RNA等,并能將這些分子傳輸到其他細胞中,從而在細胞間傳遞信息。近年來,發現外泌體中也攜帶有大量的代謝物,因此對外泌體進行代謝組學研究具有重要的意義。
外泌體非靶向代謝組學是一種全面、系統地研究外泌體中所有代謝物的科學方法。這種方法主要依賴質譜技術和核磁共振技術,配合生物信息學工具進行數據處理和解析。
在實驗操作上,首先需要通過超速離心等方法從生物體液或細胞培養液中分離出外泌體。然后通過溶解和提取,獲取外泌體中的代謝物。接下來,利用質譜或核磁共振技術進行檢測,獲取大量的數據。然后通過生物信息學工具,對數據進行處理和解析,找出代表性的或差異性的代謝物。
外泌體非靶向代謝組學能夠全面揭示外泌體的代謝物種類和含量,有助于理解外泌體在細胞間通訊中的作用機制,也有助于發現新的疾病標志物和治療靶點。例如,一些研究發現,癌癥細胞產生的外泌體中的代謝物與正常細胞的外泌體中的代謝物存在顯著差異,這可能為癌癥的早期診斷和治療提供新的思路。
外泌體非靶向代謝組學檢測方法主要包括以下步驟:
分離外泌體:首先要從生物體液或者細胞培養液中分離出外泌體。常用的分離方法有超速離心、梯度離心、免疫磁珠分選等。其中,超速離心是最常用的一種方法,利用離心力將外泌體從液體中分離出來。
提取代謝物:從分離得到的外泌體中提取代謝物。這一步通常需要用到有機溶劑,例如甲醇或氯仿,以破壞外泌體并將其中的代謝物提取出來。
代謝物檢測:提取得到的代謝物可以通過質譜技術或核磁共振技術進行檢測。其中,質譜技術主要包括液相色譜-質譜(LC-MS)和氣相色譜-質譜(GC-MS)。LC-MS以其高靈敏度和廣泛的檢測范圍,廣泛應用于非靶向代謝物檢測。GC-MS則適用于檢測揮發性和熱穩定的小分子代謝物。核磁共振(NMR)技術則可以直接、無損地檢測代謝物,并提供其結構信息。
數據處理與解析:通過質譜或核磁共振檢測得到的數據需要經過生物信息學的處理和解析,這包括數據的預處理(如噪聲去除、歸一化等),代謝物的鑒定和定量,以及統計分析等。
生物學解釋:根據分析結果,進行生物學的解釋,如代謝途徑分析,生物標志物的發現等。
通過這一系列的檢測步驟,可以全面地分析外泌體中的代謝物,了解其生物學意義。這一領域的研究對揭示細胞間的通訊機制,發現新的疾病標志物,以及研發新的藥物具有重要的價值。
證書編號:241520345370
證書編號:CNAS L22006
證書編號:ISO9001-2024001

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