HE染色
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發(fā)布時間:2025-07-25 08:49:03 更新時間:2025-09-14 15:00:14
點擊:176
作者:中科光析科學(xué)技術(shù)研究所檢測中心
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作者:中科光析科學(xué)技術(shù)研究所檢測中心
蘇木精染液為堿性,可以將組織的嗜堿性結(jié)構(gòu)(如核糖體、細(xì)胞核及細(xì)胞質(zhì)中的核糖核酸等)染成藍紫色;伊紅為酸性染料,可以將組織的嗜酸性結(jié)構(gòu)(如細(xì)胞內(nèi)及細(xì)胞間的蛋白質(zhì),包括路易體、酒精小體以及細(xì)胞質(zhì)的大部分)染成粉紅色,使整個細(xì)胞組織的形態(tài)清晰可見。組織切片方法是教學(xué)、科研、病理檢驗工作中非常常用的一種試驗方法,HE染色是在制作切片的過程中最常用
(1)樣本組織固定與切片:首先將組織樣本進行常規(guī)的石蠟包埋。在模具中加入液態(tài)石蠟,將待包埋的組織樣本放入石蠟中,確保組織位置規(guī)整。補充少許液態(tài)的石蠟后,進行降溫冷凍,使石蠟變?yōu)楣虘B(tài)達到組織固定的效果,然后使用石蠟切片機進行切片,厚度在4-8um左右。將切完后的組織切片放入載玻片上使用40℃溫水浸泡使組織充分伸展。
(2)組織樣本脫蠟:將待測組織樣本切片放于二甲苯中,充分浸泡10min,浸泡完后更換二甲苯繼續(xù)浸泡10min,目的是使用二甲苯將切片中的石蠟溶解,這樣可以在進行染液染色的時候,染液可以充分進入組織種,同時,二甲苯還可以起到透明的作用,使切片更容易觀察。
(3)組織樣本水化:將浸泡過二甲苯的待測組織樣本先放入無水乙醇中浸泡5min,使脫蠟時用的二甲苯可以被洗脫出去,使水可以進入組織中;再依次置于95%、85%、70%乙醇中各浸泡5min以達到充分水化的效果。

(4)組織切片蘇木素染色、分化與反藍:將水化后的組織樣本的切片使用PBS溶液浸泡清洗,每次浸泡5min,總共清洗3次。之后用移液槍吸取已經(jīng)預(yù)先配制好的蘇木素染色液,每個組織切片滴加100ul,充分染色10min。染色完畢后使用蒸餾水洗去多余的蘇木素染色液。然后再使用1%的鹽酸乙醇進行分化,使細(xì)胞核中結(jié)合過多的染液和細(xì)胞漿中的多余的染液被除去。分化完成后,再用雙蒸水將組織切片沖洗干凈。為了使蘇木素染藍色,使用弱堿性的促藍液加入組織切片中,讓細(xì)胞核染藍色。反藍結(jié)束后先用清水進行清洗,再用雙蒸水將組織切片沖洗干凈。
(5)組織切片伊紅染色與脫水:向上一步驟的組織樣本切片中加入伊紅染液,并使組織可以充分染色3min,染色完畢后,再將組織切片進行梯度脫水,分別使用濃度為80%、95%以及無水乙醇進行操作。80%的乙醇脫水5s,95%乙醇脫水2min,無水乙醇脫水2min。
(6)組織樣本切片風(fēng)干封片:將脫水后的組織樣本切片使用二甲苯浸泡2次,每次持續(xù)4min,然后將組織樣本切片干,并使用中性樹膠封片。
的染色方法
證書編號:241520345370
證書編號:CNAS L22006
證書編號:ISO9001-2024001

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